注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
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實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
１．PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
４．PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應該以大體積配制，試驗一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實驗與實驗之間的連續性。
６．試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應在冰浴上化開，并且要充分混勻。
Phelphthalein bisphosphate tetrasodium salt溴化鋰溶液 55 wt. % in H2O對叔丁苯  95%

Creatine phosphate sodium salt質鍶標樣 濃度范圍:2.00(mg/L)，分析標準品氯乙酰氯 98%

Sodium creatine phosphate dibasic tetrahydrate金屬鍶 99.5%氯乙酰氯 CP,97%

Deoxycholic acid sodium salt金屬鋰粒 99.9% metals basis乙基乙二酰氯酯 98%

Cholic aicd sodium Salt溴化鋰溶液 55 wt. % in H2O草酰氯 98%

Sodium taurocholate hydrate苯甲酸芐酯 CP,98.0%磷 AR,99.0% ()

DCIP苯甲 無級, 99.8%氧 電子級（）

Sodium butyrate2,5-二酚 Indicator度米芬 97%

Phytic acid sodium salt hydrate氫氧化鋇，一 99%環胞霉素A 98%

Phytic acid dodecasodium salt hydrate氯化鋇，二 GR,99.5%2,3-二甲氧基苯甲酸 99%

Sodium pyruvate氫氧化鋇，八 AR，98%3,4-二甲氧基苯甲酸 99%

Sodium carbonate anhydrous氫氧化鋇，八 CP，97%2,4-二羥基苯甲酸 98%

Sodium hydrogen carboante氫氧化鋇，八 ACS, 98% 3,4-二羥基苯甲 98%

Sodium dihydrogen phosphate mohydrate鎂 AR,99.5%3,4-二羥基苯甲 分析標準品，≥99%

Sodium phosphate mobasic dihydrate2,2-偶氮二異丁 98%異香蘭酸 97%

MSP對溴苯甲 99%3-甲氧基苯甲酸 CP,98.0%

頭孢哌酮;頭孢哌酮酸AGR2 (D9V2F) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgM/Gold  膠體金標記的兔抗馬IgM

頭孢哌酮(標準品)AGR2 (D9V2F) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgM/FITC  FITC標記的兔抗馬IgM

異硫酸羅丹明BKeratin 20 (D9Z1Z) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗馬IgM

羅丹明6G/堿性紅1/玫瑰紅6GKeratin 20 (D9Z1Z) XP® Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗馬IgM

麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B Phospho-PFKFB2 (Ser483) (D4R1W) Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgM/Cy5  Cy5標記的兔抗馬IgM

麗絲胺羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B SignalSilence® SET8 siRNA IRabbit Anti-horse IgM/Cy3  Cy3標記的兔抗馬IgM

氯化羅丹明110；羅丹明110Ring1A (D2P4D) Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgM/Bio  生物素標記的兔抗馬IgM

羅丹明123Color-coded Prestained Protein MarkerRabbit Anti-horse IgM/APC  APC標記的兔抗馬IgM

曲美布汀堿Color-coded Prestained Protein MarkerRabbit Anti-horse IgM/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗馬IgM

6-羧基四甲基羅丹明；6-TAMRASymplekin (D5Y3T) Rabbit mAbRabbit Anti-horse IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗馬IgM
豬薩佩羅病毒PCR檢測試劑盒價格人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT支

人胎球蛋白A(FETU-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃，避光1克

人肽基脯氨酰順反異構酶(PPI)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：RT1000支/包

人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

人肽酰脯氨酰異構酶(親環蛋白)樣1(PPIL1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：5克

人肽-主要組織相容性復合體復合物(pMHC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：10克

人酸酶2(CA-2)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：1克

人羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃5毫克
檢測步驟：
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個測試反應體系配制如下表：
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
（1） 計算好各試劑的使用量，加入一適當體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團：設置為FAM。淬滅基團：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。