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羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家

產品簡介

羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家
上海聯祖生物相關產品:
HGV-IgM檢測試劑盒以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械

更新時間:2021-03-13
訪問次數:824
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家

 英文名稱

 Schistosoma mattheei,PCR

 貨號

 LZP7282

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
Ocotillone4-基聯苯 97%Ph試紙 1-14

Odoratone頻那 99%大口三角燒瓶 500ml

Ohchinin acetate對苯二甲 98%直三口燒瓶 500ml

Ohchinin對苯二甲 CP具塞三角燒瓶 500ml

(Z)-23-Coumaroylhederagenin鄰 98%茄型燒瓶 500ml 24口 磨口

Olean-12-ene-3,11-diol亞磷酸三乙酯 98%茄型燒瓶 250ml 24口 磨口

Olean-12-ene-3,11-dioneN-乙基哌 98%短管標準漏斗 40mm

Olean-12-ene-3,24-diol1-乙基哌啶 98%短管標準漏斗 75mm

Olealic acid-3-O-beta-D-glucopyrasyl (1→2)-alpha-L-arabipyrasideN-(2-羥乙基)乙二胺 99%短管標準漏斗 150mm

Olealic acidN-(2-羥乙基)哌 98%茄形燒瓶 100ml/24#

Onjisaponin B高哌 98%直口三角燒瓶 1000ml

Pachymic acid2-甲基哌 98%直三口燒瓶  250ml/24#,24#,24#

Palbine1-甲基哌 99%直三口燒瓶  1000ml/24#,24#,24#

Panaxadiol無哌 99%塑料量杯  5L

Panaxatriol鈉 CP,98.0%塑料量杯  2L

Pedunculoside氫化鈉 80%洗耳球  90ml

2'-脫氧胞苷-5'-二磷酸三鈉鹽(分子生物學級)PSD93 (D4Z4D) Rabbit mAbPhospho-NF2(Ser518)  磷酸化2型神經纖維瘤抗體

(>98%,BR)DMAP1 (D4O2G) Rabbit mAbphospho-NF1(Ser2817)  磷酸化1型神經纖維瘤抗體

DMPSimpleChIP® Human DMD Intron 2 Primersphospho-NF1(Ser2515)  磷酸化1型神經纖維瘤抗體

沒食子酸月桂酯(>98.5%,BR)F4/80 (BM8.1) Rat mAb (APC-Cy7® Conjugate)phospho-NEK9(Thr210)  磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK9抗體

dUMP;2'-脫氧尿苷-5'-磷酸二鈉鹽α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NEDD4L (Ser342)  磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體

乙胺鹽酸鹽(>98%,BR)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbPhospho-NDRG1 (Thr346)  磷酸化分化相關基因NDRG1抗體

呋喃三二鈉鹽ST14/Matriptase AntibodyPhospho-NDRG1 (Ser330)  磷酸化分化相關基因NDRG1抗體

3-吲哚基-beta-D-吡喃葡萄糖苷(>98%,BR)BST2 (D5V5Z) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Thr219)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體

氧化鑭(>99%,EP)Arginase-2 Antibodyphospho-NDEL1(Ser242)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體

氯化鎂六(分子生物學)PCSK7 (D4I5G) Rabbit mAbphospho-NDEL1(Ser231)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體
羊血吸蟲PCR檢測試劑盒廠家小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT,避光25克

小鼠環孢素A(CsA)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25克

小鼠環磷酸鳥苷(cGMP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT25克

小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1公斤

小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

 

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